നീണ്ട പെപ്റ്റൈഡ് സിന്തസിസിന്റെ പ്രശ്നങ്ങളും പരിഹാരങ്ങളും

ബയോളജിക്കൽ ഗവേഷണത്തിൽ, ഒരു നീണ്ട ശ്രേണിയിലുള്ള പോളിപെപ്റ്റൈഡുകൾ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.ക്രമത്തിൽ 60-ലധികം അമിനോ ആസിഡുകളുള്ള പെപ്റ്റൈഡുകൾക്ക്, ജീൻ എക്സ്പ്രഷനും SDS-PAGE-ഉം സാധാരണയായി അവ ലഭിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.എന്നിരുന്നാലും, ഈ രീതി വളരെ സമയമെടുക്കുന്നു, അന്തിമ ഉൽപ്പന്ന വേർതിരിക്കൽ പ്രഭാവം നല്ലതല്ല.

നീണ്ട പെപ്റ്റൈഡ് സമന്വയത്തിനുള്ള വെല്ലുവിളികളും പരിഹാരങ്ങളും

ദൈർഘ്യമേറിയ പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ സമന്വയത്തിൽ, നമ്മൾ എപ്പോഴും ഒരു പ്രശ്നത്തെ അഭിമുഖീകരിക്കുന്നു, അതായത്, സിന്തസിസിലെ ക്രമം വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് കണ്ടൻസേഷൻ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ സ്റ്റെറിക് തടസ്സം വർദ്ധിക്കുന്നു, പ്രതികരണം പൂർണ്ണമാക്കുന്നതിന് പ്രതികരണ സമയം ക്രമീകരിക്കേണ്ടതുണ്ട്.എന്നിരുന്നാലും, പ്രതികരണ സമയം കൂടുന്തോറും കൂടുതൽ പാർശ്വഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാകുകയും ടാർഗെറ്റ് പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ഒരു ഭാഗം രൂപപ്പെടുകയും ചെയ്യുന്നു.അത്തരം അവശിഷ്ടങ്ങൾ - കുറവുള്ള പെപ്റ്റൈഡ് ശൃംഖലകൾ നീണ്ട പെപ്റ്റൈഡ് സിന്തസിസിൽ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കപ്പെടുന്ന പ്രധാന മാലിന്യങ്ങളാണ്.അതിനാൽ, നീളമുള്ള പെപ്റ്റൈഡിന്റെ സമന്വയത്തിൽ, നമ്മൾ മറികടക്കേണ്ട പ്രധാന പ്രശ്നം ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ള പ്രതികരണ സാഹചര്യങ്ങളും പ്രതികരണ രീതികളും പര്യവേക്ഷണം ചെയ്യുക എന്നതാണ്, അങ്ങനെ അമിനോ ആസിഡ് കണ്ടൻസേഷൻ പ്രതികരണത്തെ കൂടുതൽ സമഗ്രവും പൂർണ്ണവുമാക്കുന്നു.കൂടാതെ, പ്രതികരണ സമയം കുറയ്ക്കുക, കാരണം കൂടുതൽ പ്രതികരണ സമയം, കൂടുതൽ അനിയന്ത്രിതമായ പാർശ്വഫലങ്ങൾ, കൂടുതൽ സങ്കീർണ്ണമായ ഉപോൽപ്പന്നങ്ങൾ.അതിനാൽ, ഇനിപ്പറയുന്ന മൂന്ന് പോയിന്റുകൾ സംഗ്രഹിച്ചിരിക്കുന്നു:

മൈക്രോവേവ് സിന്തസിസ് ഉപയോഗിക്കാം: സംയോജിപ്പിക്കാൻ എളുപ്പമല്ലാത്ത ചില അമിനോ ആസിഡുകൾക്ക് സിന്തസിസ് പ്രക്രിയയിൽ, മൈക്രോവേവ് സിന്തസിസ് ഉപയോഗിക്കാം.ഈ രീതിക്ക് ശ്രദ്ധേയമായ ഫലങ്ങളുണ്ട്, കൂടാതെ പ്രതികരണ സമയം വളരെ കുറയ്ക്കുകയും രണ്ട് പ്രധാന ഉപോൽപ്പന്നങ്ങളുടെ രൂപീകരണം കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഫ്രാഗ്മെന്റ് സിന്തസിസ് രീതി ഉപയോഗിക്കാം: ചില പെപ്റ്റൈഡുകൾ സാധാരണ സിന്തസിസ് രീതികളിലൂടെ സമന്വയിപ്പിക്കാൻ പ്രയാസമുള്ളതും ശുദ്ധീകരിക്കാൻ എളുപ്പമല്ലാത്തതും ആയപ്പോൾ, നമുക്ക് പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ഒരു പ്രത്യേക വിഭാഗത്തിലെ നിരവധി അമിനോ ആസിഡുകളുടെ മുഴുവൻ ഘനീഭവനവും പെപ്റ്റൈഡ് ശൃംഖലയിലേക്ക് മൊത്തത്തിൽ സ്വീകരിക്കാം.ഈ രീതിക്ക് സമന്വയത്തിലെ നിരവധി പ്രശ്നങ്ങൾ പരിഹരിക്കാനും കഴിയും.

Acylhydrazide സിന്തസിസ് ഉപയോഗിക്കാം: പെപ്റ്റൈഡ് ബോണ്ടിംഗ് രീതി കൈവരിക്കുന്നതിന് അമൈഡ് ബോണ്ടുകളുടെ രൂപീകരണത്തിനിടയിൽ എൻ-ടെർമിനൽ സിസ് പെപ്റ്റൈഡിന്റെയും സി-ടെർമിനൽ പോളിപെപ്റ്റൈഡ് ഹൈഡ്രാസൈഡിന്റെയും കെമിക്കൽ സെലക്ടീവ് പ്രതികരണത്തിന്റെ സോളിഡ്-ഫേസ് സിന്തസിസിന്റെ ഒരു രീതിയാണ് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ അസൈൽഹൈഡ്രസൈഡ് സിന്തസിസ്.പെപ്റ്റൈഡ് ശൃംഖലയിലെ Cys-ന്റെ സ്ഥാനത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഈ രീതി മുഴുവൻ പെപ്റ്റൈഡ് ശൃംഖലയെയും ഒന്നിലധികം ശ്രേണികളായി വിഭജിക്കുകയും അവയെ യഥാക്രമം സമന്വയിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.അവസാനമായി, ലിക്വിഡ്-ഫേസ് കണ്ടൻസേഷൻ റിയാക്ഷൻ വഴിയാണ് ടാർഗെറ്റ് പെപ്റ്റൈഡ് ലഭിക്കുന്നത്.ഈ രീതി ദൈർഘ്യമേറിയ പെപ്റ്റൈഡിന്റെ സമന്വയ സമയം വളരെ കുറയ്ക്കുക മാത്രമല്ല, അന്തിമ ഉൽപ്പന്നത്തിന്റെ പരിശുദ്ധി ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

നീണ്ട പെപ്റ്റൈഡ് ശുദ്ധീകരണം

നീളമുള്ള പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ പ്രത്യേകത അനിവാര്യമായും ക്രൂഡ് പെപ്റ്റൈഡുകളുടെ സങ്കീർണ്ണ ഘടകങ്ങളിലേക്ക് നയിക്കുന്നു.അതിനാൽ, നീളമുള്ള പെപ്റ്റൈഡുകൾ എച്ച്പിഎൽസി ശുദ്ധീകരിക്കുക എന്നത് ഒരു വെല്ലുവിളി കൂടിയാണ്.പോളിപെപ്റ്റൈഡ് ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയയുടെ അമിലോയ്ഡ് സീരീസ്, ധാരാളം അനുഭവങ്ങൾ ആഗിരണം ചെയ്യുകയും നീണ്ട പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ശുദ്ധീകരണത്തിൽ വിജയകരമായി ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.പുതിയ ഉപകരണങ്ങൾ സ്വീകരിക്കുക, ഒന്നിലധികം ശുദ്ധീകരണ സംവിധാനങ്ങൾ മിക്സ് ചെയ്യുക, ആവർത്തിച്ചുള്ള വേർതിരിക്കൽ, മറ്റ് അനുഭവ രീതികൾ എന്നിവയിലൂടെ, നീണ്ട പെപ്റ്റൈഡ് ശുദ്ധീകരണത്തിന്റെ വിജയ നിരക്ക് വളരെയധികം മെച്ചപ്പെടുത്തി.