HPLC പരാജയങ്ങൾക്കും പരിഹാരങ്ങൾക്കും ഏറ്റവും സാധ്യതയുള്ളത്

ഉയർന്ന കൃത്യതയുള്ള ഉപകരണമെന്ന നിലയിൽ, എച്ച്‌പി‌എൽ‌സി ഉപയോഗ സമയത്ത് ശരിയായ രീതിയിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്നില്ലെങ്കിൽ ചില പ്രശ്‌നകരമായ ചെറിയ പ്രശ്‌നങ്ങളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം.ഏറ്റവും സാധാരണമായ പ്രശ്നങ്ങളിലൊന്നാണ് കോളം കംപ്രഷൻ പ്രശ്നം.ഒരു തെറ്റായ ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫ് എങ്ങനെ വേഗത്തിൽ പരിഹരിക്കാം.HPLC സിസ്റ്റത്തിൽ പ്രധാനമായും ഒരു റിസർവോയർ ബോട്ടിൽ, ഒരു പമ്പ്, ഒരു ഇൻജക്ടർ, ഒരു കോളം, ഒരു കോളം ടെമ്പറേച്ചർ ചേമ്പർ, ഒരു ഡിറ്റക്ടർ, ഒരു ഡാറ്റ പ്രോസസ്സിംഗ് സിസ്റ്റം എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.മുഴുവൻ സിസ്റ്റത്തിനും, തൂണുകളും പമ്പുകളും ഡിറ്റക്ടറുകളും പ്രധാന ഘടകങ്ങളും പ്രശ്നങ്ങൾക്ക് സാധ്യതയുള്ള പ്രധാന സ്ഥലങ്ങളുമാണ്.

HPLC ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ വളരെ ശ്രദ്ധ ആവശ്യമുള്ള മേഖലയാണ് കോളം മർദ്ദത്തിന്റെ താക്കോൽ.നിരയുടെ മർദ്ദത്തിന്റെ സ്ഥിരത ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് പീക്ക് ആകൃതി, നിരയുടെ കാര്യക്ഷമത, വേർതിരിക്കൽ കാര്യക്ഷമത, നിലനിർത്തൽ സമയം എന്നിവയുമായി അടുത്ത ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.കോളം മർദ്ദം സ്ഥിരത എന്നത് മർദ്ദത്തിന്റെ മൂല്യം സ്ഥിരതയുള്ള മൂല്യത്തിൽ സ്ഥിരതയുള്ളതാണെന്ന് അർത്ഥമാക്കുന്നില്ല, മറിച്ച് മർദ്ദത്തിന്റെ ഏറ്റക്കുറച്ചിലുകളുടെ പരിധി 345kPa അല്ലെങ്കിൽ 50PSI യ്‌ക്കിടയിലാണ് (കോളത്തിന്റെ മർദ്ദം സ്ഥിരതയുള്ളതും സാവധാനം മാറുന്നതുമായപ്പോൾ ഗ്രേഡിയന്റ് എല്യൂഷൻ ഉപയോഗിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു).വളരെ ഉയർന്നതോ കുറഞ്ഞതോ ആയ മർദ്ദം കോളം മർദ്ദത്തിന്റെ പ്രശ്നമാണ്.

HPLC പരാജയങ്ങൾക്കും പരിഹാരങ്ങൾക്കും ഏറ്റവും സാധ്യതയുള്ളത്

1, എച്ച്പിഎൽസിയുടെ ഉപയോഗത്തിലെ ഏറ്റവും സാധാരണമായ പ്രശ്നമാണ് ഉയർന്ന മർദ്ദം.ഇതിനർത്ഥം സമ്മർദ്ദത്തിൽ പെട്ടെന്നുള്ള വർദ്ധനവ് എന്നാണ്.പൊതുവായി, ഇനിപ്പറയുന്ന കാരണങ്ങളുണ്ട്: (1) പൊതുവേ, ഇത് ഫ്ലോ ചാനൽ തടസ്സം മൂലമാണ്.ഈ ഘട്ടത്തിൽ, ഞങ്ങൾ അത് കഷണങ്ങളായി പരിശോധിക്കണം.എ.ആദ്യം, വാക്വം പമ്പിന്റെ ഇൻലെറ്റ് മുറിക്കുക.ഈ സമയത്ത്, PEEK ട്യൂബ് ദ്രാവകം കൊണ്ട് നിറച്ചതിനാൽ PEEK ട്യൂബ് സോൾവെന്റ് ബോട്ടിലേക്കാൾ ചെറുതായതിനാൽ ദ്രാവകം ഇഷ്ടാനുസരണം ഒഴുകുന്നുണ്ടോ എന്ന് നോക്കാൻ.ദ്രാവകം തുള്ളി അല്ലെങ്കിൽ സാവധാനം തുള്ളി ഇല്ലെങ്കിൽ, സോൾവെന്റ് ഫിൽട്ടർ ഹെഡ് തടഞ്ഞു.ചികിത്സ: 30% നൈട്രിക് ആസിഡിൽ അരമണിക്കൂറോളം മുക്കിവയ്ക്കുക, അൾട്രാപുർ വെള്ളത്തിൽ കഴുകുക.ദ്രാവകം ക്രമരഹിതമായി തുള്ളിയാൽ, സോൾവെന്റ് ഫിൽട്ടർ ഹെഡ് സാധാരണമാണ്, അത് പരിശോധിച്ചുകൊണ്ടിരിക്കുകയാണ്;ബി.ശുദ്ധീകരണ വാൽവ് തുറക്കുക, അങ്ങനെ മൊബൈൽ ഘട്ടം നിരയിലൂടെ കടന്നുപോകില്ല, സമ്മർദ്ദം ഗണ്യമായി കുറയുന്നില്ലെങ്കിൽ, ഫിൽട്ടർ വൈറ്റ് ഹെഡ് തടഞ്ഞു.ചികിത്സ: ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത വൈറ്റ്ഹെഡ്സ് നീക്കം ചെയ്യുകയും 10% ഐസോപ്രോപനോൾ ഉപയോഗിച്ച് അരമണിക്കൂറോളം സോണിക്കേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു.മർദ്ദം 100PSI-ന് താഴെയായി കുറയുന്നുവെന്ന് കരുതുക, ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത വെളുത്ത തല സാധാരണമാണ്, അത് പരിശോധിച്ചുവരികയാണ്;സി.നിരയുടെ എക്സിറ്റ് അവസാനം നീക്കം ചെയ്യുക, മർദ്ദം കുറയുന്നില്ലെങ്കിൽ, കോളം തടഞ്ഞു.ചികിത്സ: ഇത് ഒരു ബഫർ ഉപ്പ് തടസ്സമാണെങ്കിൽ, മർദ്ദം സാധാരണമാകുന്നതുവരെ 95% കഴുകുക.കൂടുതൽ സംരക്ഷിത വസ്തുക്കൾ മൂലമാണ് തടസ്സം സംഭവിക്കുന്നതെങ്കിൽ, സാധാരണ മർദ്ദത്തിലേക്ക് കുതിക്കാൻ നിലവിലെ മൊബൈൽ ഘട്ടത്തേക്കാൾ ശക്തമായ ഒഴുക്ക് ഉപയോഗിക്കണം.മേൽപ്പറഞ്ഞ രീതി അനുസരിച്ച് ദീർഘകാല ക്ലീനിംഗ് മർദ്ദം കുറയുന്നില്ലെങ്കിൽ, നിരയുടെ ഇൻലെറ്റും ഔട്ട്ലെറ്റും വിപരീതമായി ഉപകരണവുമായി ബന്ധിപ്പിച്ചതായി കണക്കാക്കാം, കൂടാതെ മൊബൈൽ ഘട്ടം ഉപയോഗിച്ച് കോളം വൃത്തിയാക്കാനും കഴിയും.ഈ സമയത്ത്, നിരയുടെ മർദ്ദം ഇപ്പോഴും കുറയുന്നില്ലെങ്കിൽ, കോളം പ്രവേശന അരിപ്പ പ്ലേറ്റ് മാറ്റിസ്ഥാപിക്കാൻ മാത്രമേ കഴിയൂ, എന്നാൽ പ്രവർത്തനം നല്ലതല്ലെങ്കിൽ, കോളം ഇഫക്റ്റിന്റെ കുറവിലേക്ക് നയിക്കാൻ എളുപ്പമാണ്, അതിനാൽ കുറച്ച് ഉപയോഗിക്കാൻ ശ്രമിക്കുക.ബുദ്ധിമുട്ടുള്ള പ്രശ്നങ്ങൾക്ക്, കോളം മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുന്നത് പരിഗണിക്കാം.

(2) തെറ്റായ ഫ്ലോ റേറ്റ് ക്രമീകരണം: ശരിയായ ഫ്ലോ റേറ്റ് റീസെറ്റ് ചെയ്യാം.

(3) തെറ്റായ ഫ്ലോ റേഷ്യോ: ഫ്ലോകളുടെ വ്യത്യസ്ത അനുപാതങ്ങളുടെ വിസ്കോസിറ്റി സൂചിക വ്യത്യസ്തമാണ്, കൂടാതെ ഉയർന്ന വിസ്കോസിറ്റി ഉള്ള ഒഴുക്കിന്റെ അനുബന്ധ സിസ്റ്റം മർദ്ദവും വലുതാണ്.സാധ്യമെങ്കിൽ, കുറഞ്ഞ വിസ്കോസിറ്റി ലായകങ്ങൾ മാറ്റിസ്ഥാപിക്കാം അല്ലെങ്കിൽ വീണ്ടും സജ്ജമാക്കി തയ്യാറാക്കാം.

(4) സിസ്റ്റം പ്രഷർ സീറോ ഡ്രിഫ്റ്റ്: ലിക്വിഡ് ലെവൽ സെൻസറിന്റെ പൂജ്യം ക്രമീകരിക്കുക.

2, മർദ്ദം വളരെ കുറവാണ് (1) സാധാരണയായി സിസ്റ്റം ചോർച്ച മൂലമാണ് സംഭവിക്കുന്നത്.എന്തുചെയ്യണം: ഓരോ കണക്ഷനും കണ്ടെത്തുക, പ്രത്യേകിച്ച് നിരയുടെ രണ്ടറ്റത്തും ഇന്റർഫേസ്, ചോർച്ച പ്രദേശം ശക്തമാക്കുക.പോസ്‌റ്റ് നീക്കം ചെയ്‌ത് ഉചിതമായ ബലത്തിൽ PTFE ഫിലിം മുറുക്കുക അല്ലെങ്കിൽ ലൈൻ ചെയ്യുക.

(2) വാതകം പമ്പിലേക്ക് പ്രവേശിക്കുന്നു, എന്നാൽ ഈ സമയത്ത് മർദ്ദം സാധാരണയായി അസ്ഥിരമാണ്, ഉയർന്നതും താഴ്ന്നതുമാണ്.കൂടുതൽ ഗൗരവമായി, പമ്പിന് ദ്രാവകം ആഗിരണം ചെയ്യാൻ കഴിയില്ല.ചികിത്സാ രീതി: ക്ലീനിംഗ് വാൽവ് തുറന്ന് 3~5ml/min എന്ന തോതിൽ വൃത്തിയാക്കുക.ഇല്ലെങ്കിൽ, ഒരു പ്രത്യേക സൂചി ട്യൂബ് ഉപയോഗിച്ച് എക്‌സ്‌ഹോസ്റ്റ് വാൽവിൽ വായു കുമിളകൾ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു.

(3) മൊബൈൽ ഫേസ് ഔട്ട്‌ഫ്ലോ ഇല്ല: റിസർവോയർ ബോട്ടിലിൽ ഒരു മൊബൈൽ ഫേസ് ഉണ്ടോ, മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിൽ സിങ്ക് മുങ്ങിയിട്ടുണ്ടോ, പമ്പ് പ്രവർത്തിക്കുന്നുണ്ടോ എന്ന് പരിശോധിക്കുക.

(4) റഫറൻസ് വാൽവ് അടച്ചിട്ടില്ല: റഫറൻസ് വാൽവ് വേഗത കുറയുന്നതിന് ശേഷം അടച്ചിരിക്കുന്നു.ഇത് സാധാരണയായി 0.1 ആയി കുറയുന്നു.റഫറൻസ് വാൽവ് അടച്ചതിന് ശേഷം ~ 0.2mL/ മിനിറ്റ്.

സംഗ്രഹം:

ഈ പേപ്പറിൽ, ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയിലെ സാധാരണ പ്രശ്നങ്ങൾ മാത്രമേ വിശകലനം ചെയ്തിട്ടുള്ളൂ.തീർച്ചയായും, ഞങ്ങളുടെ പ്രായോഗിക പ്രയോഗത്തിൽ, ഞങ്ങൾ കൂടുതൽ പ്രശ്നങ്ങൾ നേരിടേണ്ടിവരും.തെറ്റ് കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നതിൽ, നമ്മൾ ഇനിപ്പറയുന്ന തത്ത്വങ്ങൾ പാലിക്കണം: സാങ്കൽപ്പിക ഘടകവും പ്രശ്നവും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു സമയം ഒരു ഘടകം മാത്രം മാറ്റുക;സാധാരണയായി, ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗിനായി ഭാഗങ്ങൾ മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുമ്പോൾ, മാലിന്യം തടയുന്നതിനായി പൊളിച്ചുമാറ്റിയ കേടുകൂടാത്ത ഭാഗങ്ങൾ വീണ്ടും സ്ഥാപിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കണം;ഒരു നല്ല റെക്കോർഡ് ശീലം രൂപപ്പെടുത്തുന്നത് തെറ്റ് കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നതിനുള്ള വിജയത്തിന്റെ താക്കോലാണ്.ഉപസംഹാരമായി, HPLC ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, സാമ്പിൾ പ്രീട്രീറ്റ്മെന്റും ഉപകരണങ്ങളുടെ ശരിയായ പ്രവർത്തനവും പരിപാലനവും ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്.