ഫോസ്ഫോറിക് ആസിഡ് പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ധാരണ

പെപ്റ്റൈഡുകളിൽ സ്ഥിതി ചെയ്യുന്ന Tyrr, Ser, Thr എന്നിവയെ ഫോസ്ഫോറിലേറ്റിംഗ് ചെയ്യുന്ന ജീവിത പ്രക്രിയകളിൽ ഇത് ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു.ഫോസ്ഫോറിക് ആസിഡ് പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ഉൽപാദനത്തിൽ ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് അമിനോ ആസിഡ് സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, നിലവിൽ സിംഗിൾ ഫിനൈൽ ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് അമിനോ ആസിഡുകളിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു.ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് അമിനോ ആസിഡുകൾ HOBt/DIEA രീതിയുമായി ബന്ധിപ്പിക്കാൻ HBTU/ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് അമിനോ ആസിഡുകൾ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, എന്നാൽ ഫോസ്ഫോറിക് ആസിഡ് പെപ്റ്റൈഡ് ഈ സമീപന വൈകല്യങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നു, പ്രത്യേകിച്ച് ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്ന വളരെ ദൈർഘ്യമേറിയ പെപ്റ്റൈഡ് പെപ്റ്റൈഡുകൾ അല്ലെങ്കിൽ അമിനോ ആസിഡ് ഫോസ്ഫേറ്റിൽ, കാര്യക്ഷമത കുറവാണ്, കുറവാണ്. അന്തിമ ഉൽപ്പന്നത്തിന്റെ പരിശുദ്ധി.ഈ ഫോസ്ഫോപെപ്റ്റൈഡിനായി, ഞങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുത്ത പോസ്റ്റ്-ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ സമീപനം പരിഗണിച്ചു.പെപ്റ്റൈഡ് സിന്തസിസിന് ശേഷം ലേബൽ ചെയ്യേണ്ട അമിനോ ആസിഡ് സൈഡ്-ചെയിൻ പ്രൊട്ടക്റ്റീവ് ഗ്രൂപ്പുകളെ തിരഞ്ഞെടുത്ത് നീക്കം ചെയ്യുന്നതാണ് ജനറേഷൻ പ്രക്രിയ.Tyr-നെ സംബന്ധിച്ചിടത്തോളം, സുരക്ഷിതമല്ലാത്ത സൈഡ് ചെയിനുകളുള്ള അമിനോ ആസിഡുകൾ ഉപയോഗിച്ച് Thr-ന് നേരിട്ട് പ്രതികരിക്കാൻ കഴിയും.-Ser (trt), 1%TFA/DCM പരിതസ്ഥിതിയിൽ അളവ് നീക്കം ചെയ്തു.

ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ, ഇരട്ട ബെൻസീൻ ഫോസ്ഫൈറ്റ് ഫോസ്ഫോറാമൈഡും നാല് നൈട്രജനും ഉത്പാദിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ ഫോസ്ഫോറാമൈഡ് ടെട്രാസോലിയം സജീവമായ ഇടനിലകൾ, ഹൈഡ്രോക്സിയുമായി ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു, തുടർന്ന് ആസിഡ് പെറോക്സൈഡ് ഓക്സിഡേഷൻ ഫോസ്ഫോറൈൽ രൂപീകരണത്തിന് കീഴിൽ, പൂർണ്ണമായ പ്രതികരണം.

നിലവിൽ, പെപ്റ്റൈഡ് ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് മോഡിഫിക്കേഷൻ രീതിക്ക് രണ്ട് പ്രധാന തരങ്ങളുണ്ട്:

(1) പോളിപെപ്റ്റൈഡ് സീക്വൻസിലേക്ക് മിതമായ ഉറപ്പുള്ള ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് അമിനോ ആസിഡുകളുടെ നേരിട്ടുള്ള ആമുഖം;

(2) പെപ്‌റ്റൈഡ് സീക്വൻസിൽ ജനറേറ്റ് ചെയ്യുന്ന റെസിൻ ശേഷം, സൈഡ് ചെയിൻ ഹൈഡ്രോക്‌സിലിന്റെ സെർ, ടൈർ അല്ലെങ്കിൽ Thr ഫോസ്‌ഫോറിലേഷൻ വരെ.

1) മിതമായ ഗ്യാരന്റി ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് അമിനോ ആസിഡുകൾ നേരിട്ട് പെപ്റ്റൈഡ് സീക്വൻസ് അവതരിപ്പിക്കും:

അതായത്, ഫോസ്‌ഫോറിലേറ്റഡ് ചെയ്യേണ്ട അമിനോ ആസിഡുകൾ (Thr,Ser അല്ലെങ്കിൽ Tyr) ഉപയോഗിച്ച് മുൻ‌കൂട്ടി ഫോസ്‌ഫോറിലേറ്റ് ചെയ്യുകയും ഉചിതമായി സംരക്ഷിക്കുകയും ചെയ്യും, തുടർന്ന് സാധാരണ SPPS ഉൽപാദന പ്രക്രിയയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി പോളിപെപ്റ്റൈഡ് സൂചികയുടെ തിരഞ്ഞെടുപ്പ് പോയിന്റിലേക്ക് ഫോസ്‌ഫോറിലേഷൻ ചുരുങ്ങും. .ഈ രീതി പ്രവർത്തിക്കാൻ എളുപ്പമാണ്, പെപ്റ്റൈഡ് എന്റർപ്രൈസസ് ഫോസ്ഫോറിലേറ്റഡ് പരിഷ്ക്കരണത്തിന്റെ പ്രധാന രീതിയായി മാറിയിരിക്കുന്നു.

2) പെപ്റ്റൈഡ് സീക്വൻസിൽ ജനറേറ്റ് ചെയ്ത റെസിൻ ശേഷം, സെർ ഹൈഡ്രോക്സി ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ, ടൈർ, അല്ലെങ്കിൽ Thr സൈഡ് ചെയിനുകളിലേക്ക്:

പോളിപെപ്റ്റൈഡ് രീതിയിലേക്ക് ഒരൊറ്റ സങ്കോചത്തിന്റെ ഫോസ്‌ഫോറിലേഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ഫോസ്‌ഫോറിലേഷൻ അലങ്കാരം, സൈഡ് ചെയിൻ ഡെക്കറേഷനിൽ വലിയ ഗ്രൂപ്പുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്ന സ്റ്റെറിക് തടസ്സം കാരണം, അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ഫോസ്‌ഫോറിലേഷൻ പെപ്റ്റൈഡ് ശൃംഖലയുമായി ചുരുങ്ങുന്നത് ബുദ്ധിമുട്ടാണ്.ഭാവിയിൽ, അമിനോ ആസിഡുകളുടെ ആമുഖം കൂടുതൽ ബുദ്ധിമുട്ടായിരിക്കും, പ്രത്യേകിച്ച് ഒന്നിലധികം ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ സൈറ്റുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന അലങ്കാരത്തിൽ, ജനറേഷൻ വളരെ ബുദ്ധിമുട്ടായിരിക്കും, അന്തിമ ഉൽപ്പന്ന ഘടന സങ്കീർണ്ണവും വേർതിരിക്കാൻ പ്രയാസമാണ്, വിളവ് വളരെ കുറവാണ്.

അതിനാൽ, പെപ്‌റ്റൈഡ് ശൃംഖലയിലെ ഒന്നിലധികം സൈറ്റുകൾ ഫോസ്‌ഫോറിലേറ്റഡ് ആയിരിക്കുമ്പോൾ, ഒരാൾക്ക് റെസിനിൽ പെപ്റ്റൈഡ് സീക്വൻസ് ജനറേറ്റ് ചെയ്യാനും തുടർന്ന് സെർ, ടൈർ അല്ലെങ്കിൽ Thr എന്നിവയുടെ സൈഡ് ചെയിൻ ഹൈഡ്രോക്‌സിൽ ഗ്രൂപ്പിലൂടെ ഫോസ്‌ഫോറിലേറ്റ് ചെയ്യാനും തിരഞ്ഞെടുക്കാം: അതിന്റെ തലമുറ പ്രധാനമായും സെലക്ടീവ് നീക്കം ചെയ്യുന്നതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു. പെപ്റ്റൈഡ് സമന്വയത്തിനു ശേഷം അമിനോ ആസിഡുകളുടെ തിരിച്ചറിയൽ ആവശ്യമായ സൈഡ് ചെയിൻ പ്രൊട്ടക്റ്റീവ് ഗ്രൂപ്പ്.Tyr-നെ സംബന്ധിച്ചിടത്തോളം, Thr-ന് നേരിട്ട് അമിനോ ആസിഡ് സൈഡ് ചെയിനുകൾ ഉപയോഗിക്കാൻ കഴിയും പ്രതികരണമായി സംരക്ഷിക്കപ്പെടുന്നില്ല.

സൈഡ് ചെയിൻ പ്രൊട്ടക്ഷൻ ബേസ് 1% TFA/DCM എൻവയോൺമെന്റ് അളവ് നീക്കം ചെയ്യാൻ കഴിയും.ഈ രീതി തിരഞ്ഞെടുക്കുമ്പോൾ, ഡൈബെൻസിൽ ഫോസ്ഫോറാമിഡൈറ്റ്, ടെട്രാസോലിയം എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ഫോസ്ഫോറാമിഡൈറ്റ് ടെട്രാസോളിയം സജീവമായ ഇന്റർമീഡിയറ്റ് സൃഷ്ടിക്കാൻ കഴിയും, ഇത് ഒരു ഹൈഡ്രോക്സൈൽ ഗ്രൂപ്പുമായി ബന്ധിപ്പിച്ച്, പ്രതികരണം പൂർത്തിയാക്കാൻ പെറോക്സൈസിഡ് പരിതസ്ഥിതിയിൽ ഒരു ഫോസ്ഫോറൈൽ ഗ്രൂപ്പ് രൂപീകരിക്കാൻ ഓക്സിഡൈസ് ചെയ്യാം.